乳香没药及其提取物对大鼠肝毒性的实验研究_谈英

中图分类号：R282；R994.11文献标识码：A文章编号：1672-8629（2010）04-0193-03

·基础研究·

乳香没药及其提取物对大鼠肝毒性的实验研究

2谈英1徐鑫2周昆2何健1屈彩芹2高秀梅2（1三九医药股份有限公司研发事业部，深圳518029；天津中医药

大学中医药研究院，天津300193）

分别予乳摘要：目的比较乳香没药生药及其不同提取物对大鼠的肝脏毒性作用。方法Wistar大鼠连续灌胃12周，香没药生药粉、挥发油、水提物、挥发油＋水提物，各给药组剂量均为3g生药/kg，同时设对照组。末次给药后禁食12h后，腹主动脉取血进行血液生化学检测，取肝脏称重并计算肝系数，检测肝组织中的氧化应激指标丙二醛（MDA）和），光镜下做肝脏病理组织学检查。结果乳香没药生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠超氧化物歧化酶（SOD总胆固醇（TC）明显高于对照组（P<0.01）；生药组、挥发油＋水提物组大鼠白蛋白（ALB）高于对照组（P<0.05）。乳香没药生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠肝脏系数明显升高（P<0.01）；挥发油组大鼠肝脏系数无明显变化。氧化MDA除挥发油组外，其他各给药组均高于对照组（P<0.005～0.01）；SOD各给药组均没有明显影应激指标检测表明，

响。肝脏病理组织学检查表明，除挥发油组外，其他各给药组均出现不同程度的肝细胞空泡性病变。结论乳香没药生药、水提物、挥发油+水提物均可造成大鼠肝脏不同程度的损伤，损伤机制可能与过氧化应激途径有关；挥发油对肝脏没有明显影响。

乳香没药生药；乳香没药水提物；乳香没药挥发油；大鼠；肝毒性关键词：

TheStudyOnHepatotoxicityofMasticandMyrrhainRats

TANYing1XUXin2ZHOUKun2HEJian1QUCai-qin2GAOXiu-mei2(1R&DDepartmentofSanjiuMedical&PharmacuticalCO.LTD,Shenzhen518029,China;2InstituteofTraditionalChineseMedicine,TianjinUniversityofTCM,Tianjin300193,China)

Abstract:ObjectiveTocomparethemixtureofOlibanumandMyrrhaandtheirdifferentextracts,soastoinvestigatethehepatotoxicityinrats.MethodsWistarratswereadministeredintragastricallyfor12weekswithOlibanum+Myrrhacrudepowder,volatileoil,aqueousextract,volatileoil+aqueousextract(3g/kg)anddistilledwater(controlgroup).Aftertheendoflastadministration,ratswereanesthesiabychloralhydrateafterfastingfor12hours.Bloodwastakenfromabdominalaortaandbloodbiochemistryindicesweredetermined.TheLiverwasweightedandlivercoefficientwascalculated,andMalondialchehyche(SOD)andSuperoxideDismutase(SOD)wastestedinlivertissuealso.Thepathologicallyexaminationfortheliverwasperformedwithlightmicroscopt.ResultsTotalcholesterd(TC)ingroupofOlibanum+Myrrhacrudepowder,aqueousextract,volatileoil+aqueousextract,werehigherthanthatofthecontrolgroup(P<0.01).Albumin(ALB)ingroupofOlibanum+Myrrhacrudepowder,volatileoil+aqueousextract,werehigherthanthatofthecontrolgroup(P<0.05).Comparedwiththecontrolgroup,LivercoefficientindexingroupofOlibanum+Myrrhacrudepowder,aqueousextract,volatileoil+aqueousextractwereincreasedsignificantly(P<0.01),whilelivercoefficientindexinvolatileoilgroupremainedunchangedsignificantly.Malondial-dehyde(MDA)inlivertissueofthetreatmentgroupanimalsexceptvolatileoilwerehigherthanthatofthecontrolgroup(P<0.005～0.01).Liverhistopathologicalexaminationshowedthattheratsofthetreatmentgroupexceptvolatileoilweresufferedfromvariousdegreesofvacuolardegeneration.ConclusionRatsingroupofOlibanumandMyrrha,aqueousextract,volatileoilandaqueousextractwereobservedliverdamageatvariousdegreeswhichmaybeconcernedwithhigheroxidativestress,whilenosignificanteffectingroupofvolatileoil.

Keywords:OlibanumandMyrrha;aqueousextract;volatileoil;rats;hepatotoxicity

乳香与没药为常用的活血止痛、消肿生肌的中药，由于它们的性味、功能相同，临床上常相须合用。前期研究发现[1]，壮骨关节丸中以原粉入药的乳香与没药对

作者简介：谈英，男，硕士，主治医师，药物安全性研究与新药研发。

Beagle犬肝脏功能具有一定影响，为了考察乳香没药生药粉和不同提取物的毒性差别，为工艺改进提供依据，进行了乳香没药生药粉及其提取物灌胃12周对大鼠肝毒性的实验研究。

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中国药物警戒第7卷第4期2010年4月April,2010,Vol.7,No.4

1材料2方法

1.1受试药乳香没药生药（简称生药），棕色粉末；乳香没药水提物（简称水提物），棕色粉末；乳香没药挥发油（简称挥发油），白色粉末；乳香没药挥发油＋水提物（简称挥发油+水提物），棕色粉末。以上批号均为070925。

2.1实验方法Wistar大鼠60只，雌雄各半，随机分为5组，每组12只，分为对照组、生药组、挥发油组、水提物组、挥发给药组剂量均为生药3g/kg，药液浓度均油＋水提物组。

为生药0.3g/mL，按1mL/100g体重灌胃给药，每日1次，连续灌胃给药12周，对照组给予等体积的蒸馏水。给药按体重调整给药量。给药12周后，期间，每周称重1次，用水合氯醛腹腔注射麻醉动物，腹主动脉取血，测定血清中ALT、AST、ALP、TP、ALB、TBIL、TC、TG。解剖称取（g）/体肝脏湿重并计算肝脏系数[肝脏系数=肝脏湿重重（g）×100%]。取肝脏组织用氯化钠注射液制成10%的将10%的肝组织肝组织匀浆，用分光光度计测定MDA；匀浆用氯化钠注射液稀释成1%，用分光光度计测定SOD。取相同位置肝叶用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋、切片、HE染色，光镜下进行病理组织学检查。

1.2动物Wistar大鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，合格证号：SCXK（京）2005-0013，饲养于天津中医药大学实验动物中心。所用饲料为全价颗粒饲料，由天津市华荣实验动物科技有限公司生产。

1.3试剂天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒（批号：070351）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒（批号：070701）、碱性）试剂盒（批号：070271）、总胆红素（TBIL）磷酸酶（ALP试剂盒（批号：070281）、TC试剂盒（批号：070501）、总甘）试剂盒（批号：071861）、总蛋白（TP）试剂盒油三酯（TG（批号：070611）、ALB试剂盒（批号：070671），以上购自中生北控生物科技股份有限公司生产。

丙二醛（MDA）试剂盒（批号：20080102）、超氧化物）试剂盒（批号：20080103），购自南京建成歧化酶（SOD生物工程研究所。

戊巴比妥钠（批号：WS20051129，国药集团化学试E07092806，山东康宁药剂有限公司）；生理盐水（批号：业有限公司）。

2.2数据处理与统计数据用SPSS13.0统计软件处理，以均值±标准差

χ（±s）表示，组间比较采用F检验。

3结果

3.1乳香没药生药及不同提取物对大鼠血清生化指标的影响生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠血清中TC明显高于对照组，挥发油组无明显影响。生药组、挥发油＋水提物组大鼠ALB高于对照组，挥发油组、水提（见表1）。物组无明显影响。其他指标未见异常

1.4仪器JJ2000精密电子天平（常熟双杰测试仪器厂），AE200电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司），Micro95半自动生化仪（荷兰威图科学公司），721型分光光度计（上海第三分析仪器厂），LDZ5-2型离心机（北BMJ-1组织包埋机（天津航空机电京医用离心机厂），公司），WH-71电热恒温干燥箱（天津泰斯特仪器有限公司），OlympusAH-2生物显微镜（日本电子），RM2135轮转式组织切片机（德国Leica）。

表1

组别对照组生药组挥发油组水提物组挥发油＋水提物组

生药剂量（g/kg）－3333

n1212121212

3.2乳香没药生药及不同提取物对大鼠肝脏系数的影响生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠肝脏系）。数明显高于对照组，挥发油组无明显影响（见表2

3.3乳香没药生药及不同提取物对大鼠肝组织中氧化应激指标的影响①MDA：生药组、水提物组、挥发油＋水提物组大鼠肝组织中MDA含量均高于对照组；挥发油对大鼠肝

χ±s乳香没药生药及不同提取物对大鼠血清生化指标的影响（）

AST（U/L）

ALT（U/L）

ALP（U/L）.1±22.653.3±23.157.4±22.250.6±17.962.4±29.5

TBIL（μmol/L）3.71±1.652.75±1.013.57±0.833.00±0.703.±1.18

TC（mmol/L）1.93±0.422.03±0.38

TG（mmol/L）

TP（g/L）

ALB（g/L）

144.8±45.244.4±24.2160.4±50.353.2±14.2139.2±28.1.1±12.6137.1±18.141.9±9.0148.3±29.0.8±17.0

0.39±0.08.8±10.844.1±6.40.45±0.1363.3±7.4.9±2.4

3.12±0.59**0.34±0.0970.4±12.150.3±7.5*2.74±0.67**0.48±0.1566.7±11.848.0±6.42.70±0.58**0.43±0.1266.0±17.753.0±7.6*

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

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中国药物警戒第7卷第4期2010年4月April,2010,Vol.7,No.4

表2

组别对照组生药组挥发油组水提物组

挥发油＋水提物组

χ±s乳香没药生药及不同提取物对大鼠肝脏系数的影响（）

生药剂量（g/kg）

－3333

n1212121212

体重（g）309.9±73.1286.6±52.4318.9±72.9274.9±51.7296.6±57.5

肝脏重量（g）9.7236±3.053213.7421±1.4712**9.5078±2.082912.4167±1.6824*13.2049±2.2066**

肝脏系数（％）3.1090±0.408.8717±0.69**2.9917±0.1.5785±0.5084**4.5120±0.87**

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

组织中MDA含量无明显影响。②SOD：各给药组对大鼠肝组织中SOD活力无明显影响（见表3）。

表3

乳香没药生药及不同提取物对大鼠肝组织中氧化应

χ±s激指标影响（）

组别对照组生药组挥发油组水提物组挥发油＋水提物组

生药剂量）（g/kg－3333

n1212121212

MDA1.56±0.362.50±0.681.38±0.272.08±0.70*2.36±0.82**

**

SOD259.02±47.84302.29±.71270.42±41.06276.15±42.49272.55±56.36

（nmol/mgprot）（U/mgprot）

图1正常肝组织（HE染色，）×200

注：与对照组比较，**P<0.01。

3.4病理结果与对照组比较，除挥发油组外，各给药组肝脏组织均出现不同程度的肝细胞空泡变性，其中生药组空泡变面积最大（见表4）。肝细胞胞浆的空泡将细胞核挤向一图2）。边，细胞核变形，窦间隙变窄，甚至消失（见图1、其中生药组空泡变面积最大。实验结果显示，乳香没药生药及水提取物均可对肝脏造成不同程度的损伤，挥发油没有明显影响。

表4乳香没药生药及不同提取物对大鼠肝脏病理组织学的影响

组别对照组生药组挥发油组水提物组挥发油＋水提物组

注：“－”细胞未发生病理改变。

图2空泡变性（HE染色，）×200

验对乳香没药生药粉、挥发油、水提物、挥发油＋水提物各组的大鼠肝脏毒性进行了比较，结果表明挥发油对大肝脏系数、肝组织没有明显影响，提取乳香鼠血清生化、

没药中的挥发油可大大降低对大鼠的肝脏毒性。

除挥发油外，其他给药组均可引起不同程度肝损伤，通过MDA、SOD检测发现，肝组织中脂质过氧化物代谢我们推测肝损伤机制与肝脏自由基增产物MDA升高，

多引起脂质过氧化，最终导致细胞功能受损有关，而自由基清除系统SOD则在该实验条件下没有明显变化。

生药剂量（g/kg）

－3333

n1212121212

空泡变面积（％）

－13－1010

参考文献：

[1]周昆,代志,柳占彪,等.壮骨关节丸中肝毒性药材的筛选研究[J].

中国药物警戒,2009,6(11):1-8.

[2]江苏新医学院.中药大辞典(上册)[M].上海:上海人民出版社,

1975:1167,1379.

[3]沈道修,任晓英,胡月红,等.乳香炮制方法的研究[J].中成药,1983,

(7):12-13.

[4]郑杭生,冯年平,陈佳,等.乳香没药的提取工艺及其提取物的镇

痛作用[J].中成药,2006,24(11):956-959.

[5]沈涛,娄红祥.没药的化学成分及其生物活性[J].天然产物研究

与开发,2008,20(2):360-366.

（收稿日期：2009-12-22

编辑：邹箴蕾）

4讨论

乳香和没药属于同科不同种的油胶树脂，在化学成分上两者也非常相似,主要含挥发油、树脂和树胶等，两种药材中挥发油含量较高，乳香中挥发油占3%～8%，没药中挥发油占2.5%～9%。现代药理学研究表明，

[2]

乳香没药的挥发油具有良好的镇痛、抗炎效果

[3-5]

。本试

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