实验四-淀粉分解菌的分离与观察

一. 目的

加深学生对微生物在物质循环中作为主要分解者的理解。

二. 基本知识

自然界蕴藏着极其丰富的元素贮备。原始地球上所含的主要元素有O、Si、Mg、S、Na、Ca、Fe、Al、P、H、C、Cl、F和N等，大自然对于生命世界来说，可比喻为一个庞大无比的“元素银行”。随着地球上生命的起源和不断繁荣发展，“元素银行”中为构建生物体所需的20多种左右常用就会逐步被“借用”直至借空，从而使它无法继续运转，因而生物界亦将不再有任何生机，届时将出现美国著名科普学家R. 卡逊在其名著《寂静的春天》中所描述的可怕情景。因此，自然法则要求任何生物个体在其短暂的一生中，只能充当一个向“元素银行”暂借所需元素的临时“客户”，而绝不允许它永久霸占。在大自然这一铁的法则中微生物实际上扮演了一个不可或缺的“逼债者”（即分解者和还原者）的作用。任何地方，一旦阻碍了微生物的生命活动，那里就会失去生态平衡，就会出现“寂静的春天”。

本实验从土壤中快速分离筛选淀粉酶产生菌，通过淀粉酶产生菌对淀粉的水解现象，加深学生对微生物作为分解者和还原者参与物质循环作用的认识。

本实验的原理是利用淀粉遇碘呈蓝紫色，当淀粉被微生物代谢的淀粉酶水解，则失去该特性，因此可以通过采用碘液快速指示淀粉分解菌。

三、材料、试剂和器材

1. 材料

土壤。

2. 试剂

（1）培养基

采用淀粉固体培养基分离培养,称取牛肉膏5g、蛋白胨10g、NaCl 5g、可溶性淀粉2g溶于900mL蒸馏水中，调pH至～，再加入15g琼脂粉并加热搅拌至充分溶解，最后加蒸馏水补足至1000mL，高压蒸汽灭菌。倒平板，备用。

（2） 碘液

称取碘（I2）5g，碘化钾（KI）10 g，用少量水使碘完全溶解，然后定容到1000 ml，储存于棕色瓶中。

3. 器材

天平、恒温培养箱、试管、三角瓶、玻璃珠、移液管（10ml，1支；1ml 12支）等。

四. 操作步骤及结果观察

1. 平板涂布

称取土样5g，倒入盛有45mL无菌水带玻璃珠的三角瓶中，摇床振荡30min制成土

壤悬液记为10-1，用无菌移液管吸取10-1的土壤悬液,放入无菌水中，混匀即为10-2稀释液，照此分别制成10-3~10-7的稀释液。分别取10-5、10-6和10-7土壤稀释液各，涂布于平板培养基表面，一个稀释度涂布接种1块平板，37℃下恒温培养16～24h。

2. 淀粉分解菌的检测

待长出菌落后，在平板上滴加碘液，观察菌落周围的淀粉水解圈。

五. 思考题

1. 假如没有微生物的分解作用，自然界将是怎样的状况

2. 你还能举出一些微生物对物质的分解方面的例子吗